تم بعون الله تعالى في كلية الطب البيطري في جامعة تكريت مناقشة رسالة الماجستير الموسومة (دراسة تأثيرات النيميسولايد ضد السمية الناتجة من السيسابلاتين في الجرذان) للطالبة (اية فريدون حسين) في تخصص الأدوية البيطرية البيطرية، حيث تألفت لجنة المناقشة من كل من:
أ.د. بثينة عبدالحميد عبدالله / تخصص ادوية وسموم / جامعة تكريت - كلية الطب البيطري/ رئيسا
أ.م.د. علي حسين سليم / تخصص ادوية وسموم / جامعة بغداد - كلية الطب البيطري/ عضوا
أ. خالد احمد هادي / تخصص فسلجة بيطرية / جامعة تكريت - كلية الطب البيطري / عضوا
أ.د. سهام عجمي وادي / تخصص ادوية بيطرية / جامعة تكريت - كلية الطب البيطري/ عضوا ومشرفا
كان ملخص الرسالة كما يلي: يُعدّ السيسبلاتين عاملاً علاجياً كيميائياً فعّالاً، غير أن استخدامه السريري يتقيّد بسبب ما يُحدثه من سمية كلوية وسمية كبدية وأذى تأكسدي للأعضاء تعتمد شدتها على الجرعة المُعطاة. أما النيميسولايد، وهو مثبّط انتقائي لإنزيم COX-2، فيمتلك خصائص مضادة للالتهاب ومضادة للأكسدة قد تُفيد في التصدي للآثار السامة للسيسبلاتين. هدفت هذه الدراسة إلى تقييم الإمكانية الوقائية للنيميسولايد ضد السمية المُحدَثة بالسيسبلاتين في الجرذان.
قُسِّمت تسعون جرذاً أنثى بيضاء ألبينو إلى تسع مجموعات (n=10)، شملت: المجموعة الضابطة، ومجموعات النيميسولايد منفرداً (10-20 ملغ/كغ)، والسيسبلاتين منفرداً (5-7 ملغ/كغ)، وأربع مجموعات تجمعية تلقّت النيميسولايد (10 أو 20 ملغ/كغ) إما كعلاج بعد أو كعلاج قبل وبعد مع السيسبلاتين (5 ملغ/كغ). جرى تحديد الجرعة المميتة المتوسطة (LD₅₀) للنيميسولايد أولاً بالطريقة التصاعدية التنازلية (Up-Down Method) ، في حين استُعينَ بقيمة LD₅₀ السيسبلاتين من المستودعات العلمية المعتمدة نظراً لتفاوت قيمها الموثّق في الأدبيات التاريخية؛ إذ بلغت 12 ملغ/كغ وفق قاعدة البيانات المعلوماتية للمواد الخطرة (HSDB) و8.3 ملغ/كغ وفق PubChem، لتوفير مرجعية مزدوجة شاملة لتقييم الأمان. كما تم احتساب المؤشر العلاجي لتقييم هامش الأمان لكلا الدوائين ومقارنته في ظروف تجربتنا وفق الصيغة القياسية. بعد ذلك، قِيسَت وظائف الكلى (كرياتينين المصل، يوريا الدم) وإنزيمات الكبد (ALT، AST، ALP) ومؤشرات الإجهاد التأكسدي (MDA، GSH، SOD، CAT، واشتُقَّت نسبتا اليوريا/الكرياتينين ونسبة دي ريتيس. (AST/ALT) علاوة على ذلك، قِيسَت التراكيز المصلية للوسائط الالتهابية والارتكاسية (Apoptotic) عامل نخر الورم ألفا (TNF-α) والإنترلوكين-6 (IL-6) والكاسبيز-3 وإنزيم الأكسدة الحلقية-2 (COX-2) بتقنية الإليزا (ELISA)؛ وذلك لتقييم العبء الالتهابي والارتكاسي الجهازي الناجم عن سمية السيسبلاتين ومدى تعديله بالنيميسولايد. كذلك أُجريَ الإرساء الجزيئي الحاسوبي (In Silico) للنيميسولايد على الكاسبيز-3 (PDB: 1CP3) وعامل نخر الورم ألفا (TNF-α) (PDB: 2AZ5) باستخدام CB-Dock2/AutoDock Vina، وصُنِّفت التفاعلات بواسطة PLIP 2.4.0.
بلغت LD₅₀ للنيميسولايد 195.8 ملغ/كغ، مما يؤكد هامش أمانه الواسع. أسفرت الجرعة الأولية من السيسبلاتين البالغة 7 ملغ/كغ عن نفوق 50% من الحيوانات، مما استوجب اعتماد جرعة 5 ملغ/كغ كجرعة دون مميتة أساسية للمجموعات الوقائية. أحدث السيسبلاتين ارتفاعاً يعتمد على الجرعة في مؤشرات الأذى الكلوي والكبدي والإجهاد التأكسدي، تمثّل في ارتفاع الكرياتينين واليوريا وALT وAST وALP و MDA، وانخفاض GSH وSOD، مع ارتفاع تعويضي في CAT. كما أحدث السيسبلاتين ارتفاعاً يعتمد على الجرعة في التراكيز المصلية لـ TNF-α وIL-6 والكاسبيز-3 وCOX-2، بلغ أقصاه عند جرعة 7 ملغ/كغ نحو 5.4 و5.1 و5.0 و6.0 أضعاف القيمة الضابطة على التوالي, أسفر الإعطاء المشترك للنيميسولايد عن حماية كلوية وكبدية وتأكسدية تعتمد على الجرعة والتوقيت، إذ أسفر نظام العلاج القبلي والبعدي بجرعة 20 ملغ/كغ عن تطبيع شامل للمعاملات البيوكيميائية والتأكسدية, كما حقق هذا النظام العلاجي تطبيعاً كاملاً إحصائياً لجميع المؤشرات الالتهابية والارتكاسية المصلية الأربعة. كشف الإرساء الجزيئي عن ألفة ارتباط عالية ومتطابقة للنيميسولايد مع الكاسبيز-3 وعامل TNF-α بلغت (-7.3 كيلوكالوري/مول) لكليهما، وأكّد PLIP آلية الإعاقة الفراغية/الأروماتية عند الموقع الفعّال للكاسبيز-3 (تكدّس باي π مع TYR195؛ وقرب الموقع التحفيزي CYS264)، فضلاً عن آلية تعطيل لـ TNF-α عبر الربط الهيدروجيني (رابطة هيدروجينية مع ARG82؛ وجسر VAL91 بين السلسلتين B و D).
أن المؤشر العلاجي المحتسَب للسيسبلاتين منفرداً كان ضيّقاً بشكل حرج، إذ تراوح بين (1.66-2.4)، مما يُفسّر النفوق غير المتوقع بنسبة 50% عند جرعة 7 ملغ/كغ. في المقابل، أظهر النيميسولايد مؤشراً علاجياً أوسع وأكثر أماناً (9.79-19.58). كما أسهم الإعطاء المشترك للنيميسولايد مع السيسبلاتين في توسيع النافذة العلاجية الفعّالة للمعالجة، تجلّى ذلك في تراجع نفوق الحيوانات وتحسّن المؤشرات البيوكيميائية.
أثبت النيميسولايد بجرعة 20 ملغ/كغ حمايةً معنويةً تعتمد على الجرعة والوقيت ضد السمية المُحدَثة بالسيسبلاتين، من خلال آليات جماعية مضادة للالتهاب ومضادة للأكسدة ومضادة للموت الخلوي المبرمج، تتوسطها المعالجة الجزيئية المزدوجة عبر الكاسبيز-3 وتعطيل واجهة الوحدات الفرعية لـ TNF-α. وقد انعكس ذلك على المستوى الجهازي بتطبيع شبه كامل لتراكيز TNF-α وIL-6 والكاسبيز-3 وCOX-2 في المصل، لا سيما في مجموعة النيميسولايد 20 ملغ/كغ (قبل وبعد).
قُسِّمت تسعون جرذاً أنثى بيضاء ألبينو إلى تسع مجموعات (n=10)، شملت: المجموعة الضابطة، ومجموعات النيميسولايد منفرداً (10-20 ملغ/كغ)، والسيسبلاتين منفرداً (5-7 ملغ/كغ)، وأربع مجموعات تجمعية تلقّت النيميسولايد (10 أو 20 ملغ/كغ) إما كعلاج بعد أو كعلاج قبل وبعد مع السيسبلاتين (5 ملغ/كغ). جرى تحديد الجرعة المميتة المتوسطة (LD₅₀) للنيميسولايد أولاً بالطريقة التصاعدية التنازلية (Up-Down Method) ، في حين استُعينَ بقيمة LD₅₀ السيسبلاتين من المستودعات العلمية المعتمدة نظراً لتفاوت قيمها الموثّق في الأدبيات التاريخية؛ إذ بلغت 12 ملغ/كغ وفق قاعدة البيانات المعلوماتية للمواد الخطرة (HSDB) و8.3 ملغ/كغ وفق PubChem، لتوفير مرجعية مزدوجة شاملة لتقييم الأمان. كما تم احتساب المؤشر العلاجي لتقييم هامش الأمان لكلا الدوائين ومقارنته في ظروف تجربتنا وفق الصيغة القياسية. بعد ذلك، قِيسَت وظائف الكلى (كرياتينين المصل، يوريا الدم) وإنزيمات الكبد (ALT، AST، ALP) ومؤشرات الإجهاد التأكسدي (MDA، GSH، SOD، CAT، واشتُقَّت نسبتا اليوريا/الكرياتينين ونسبة دي ريتيس. (AST/ALT) علاوة على ذلك، قِيسَت التراكيز المصلية للوسائط الالتهابية والارتكاسية (Apoptotic) عامل نخر الورم ألفا (TNF-α) والإنترلوكين-6 (IL-6) والكاسبيز-3 وإنزيم الأكسدة الحلقية-2 (COX-2) بتقنية الإليزا (ELISA)؛ وذلك لتقييم العبء الالتهابي والارتكاسي الجهازي الناجم عن سمية السيسبلاتين ومدى تعديله بالنيميسولايد. كذلك أُجريَ الإرساء الجزيئي الحاسوبي (In Silico) للنيميسولايد على الكاسبيز-3 (PDB: 1CP3) وعامل نخر الورم ألفا (TNF-α) (PDB: 2AZ5) باستخدام CB-Dock2/AutoDock Vina، وصُنِّفت التفاعلات بواسطة PLIP 2.4.0.
بلغت LD₅₀ للنيميسولايد 195.8 ملغ/كغ، مما يؤكد هامش أمانه الواسع. أسفرت الجرعة الأولية من السيسبلاتين البالغة 7 ملغ/كغ عن نفوق 50% من الحيوانات، مما استوجب اعتماد جرعة 5 ملغ/كغ كجرعة دون مميتة أساسية للمجموعات الوقائية. أحدث السيسبلاتين ارتفاعاً يعتمد على الجرعة في مؤشرات الأذى الكلوي والكبدي والإجهاد التأكسدي، تمثّل في ارتفاع الكرياتينين واليوريا وALT وAST وALP و MDA، وانخفاض GSH وSOD، مع ارتفاع تعويضي في CAT. كما أحدث السيسبلاتين ارتفاعاً يعتمد على الجرعة في التراكيز المصلية لـ TNF-α وIL-6 والكاسبيز-3 وCOX-2، بلغ أقصاه عند جرعة 7 ملغ/كغ نحو 5.4 و5.1 و5.0 و6.0 أضعاف القيمة الضابطة على التوالي, أسفر الإعطاء المشترك للنيميسولايد عن حماية كلوية وكبدية وتأكسدية تعتمد على الجرعة والتوقيت، إذ أسفر نظام العلاج القبلي والبعدي بجرعة 20 ملغ/كغ عن تطبيع شامل للمعاملات البيوكيميائية والتأكسدية, كما حقق هذا النظام العلاجي تطبيعاً كاملاً إحصائياً لجميع المؤشرات الالتهابية والارتكاسية المصلية الأربعة. كشف الإرساء الجزيئي عن ألفة ارتباط عالية ومتطابقة للنيميسولايد مع الكاسبيز-3 وعامل TNF-α بلغت (-7.3 كيلوكالوري/مول) لكليهما، وأكّد PLIP آلية الإعاقة الفراغية/الأروماتية عند الموقع الفعّال للكاسبيز-3 (تكدّس باي π مع TYR195؛ وقرب الموقع التحفيزي CYS264)، فضلاً عن آلية تعطيل لـ TNF-α عبر الربط الهيدروجيني (رابطة هيدروجينية مع ARG82؛ وجسر VAL91 بين السلسلتين B و D).
أن المؤشر العلاجي المحتسَب للسيسبلاتين منفرداً كان ضيّقاً بشكل حرج، إذ تراوح بين (1.66-2.4)، مما يُفسّر النفوق غير المتوقع بنسبة 50% عند جرعة 7 ملغ/كغ. في المقابل، أظهر النيميسولايد مؤشراً علاجياً أوسع وأكثر أماناً (9.79-19.58). كما أسهم الإعطاء المشترك للنيميسولايد مع السيسبلاتين في توسيع النافذة العلاجية الفعّالة للمعالجة، تجلّى ذلك في تراجع نفوق الحيوانات وتحسّن المؤشرات البيوكيميائية.
أثبت النيميسولايد بجرعة 20 ملغ/كغ حمايةً معنويةً تعتمد على الجرعة والوقيت ضد السمية المُحدَثة بالسيسبلاتين، من خلال آليات جماعية مضادة للالتهاب ومضادة للأكسدة ومضادة للموت الخلوي المبرمج، تتوسطها المعالجة الجزيئية المزدوجة عبر الكاسبيز-3 وتعطيل واجهة الوحدات الفرعية لـ TNF-α. وقد انعكس ذلك على المستوى الجهازي بتطبيع شبه كامل لتراكيز TNF-α وIL-6 والكاسبيز-3 وCOX-2 في المصل، لا سيما في مجموعة النيميسولايد 20 ملغ/كغ (قبل وبعد).
وحضر المناقشة التي اقيمت على قاعة د. مهند ماهر في كلية الطب البيطري عدد من اعضاء الهيئة التدريسية وجمع من الطلبة.
.jpg)
